Ngembangkeun metode ELISA henteu langsung pikeun ngadeteksi porcine akut sindrom diare coronavirus antibodi IgG dumasar kana protéin spike rékombinan.

Porcine Acute Diarrhea Syndrome Coronavirus (SADS-CoV) mangrupikeun coronavirus patogén enterik babi anu nembé kapendak anu tiasa nyababkeun diare cai dina babi anu nembé lahir sareng nyababkeun karugian ékonomi anu signifikan pikeun industri babi.Ayeuna, teu aya metode serologis anu cocog pikeun ngira-ngira efektivitas inféksi sareng vaksin SADS-CoV, ku kituna aya kabutuhan anu penting pikeun ngagunakeun uji immunosorbent anu aya hubunganana énzim (ELISA) anu épéktip pikeun ngémutan kakurangan ieu.Di dieu, plasmid rékombinan anu nganyatakeun protéin spike (S) SADS-CoV anu ngahiji sareng domain IgG Fc manusa didamel pikeun ngahasilkeun baculovirus rékombinan sareng dinyatakeun dina sél HEK 293F.Protéin S-Fc dimurnikeun ku résin protéin G sareng nahan réaktivitasna sareng antibodi Fc anti-manusa sareng anti-SADS-CoV.Lajeng protéin S-Fc dipaké pikeun ngembangkeun ELISA teu langsung (S-iELISA) jeung ngaoptimalkeun kaayaan réaksi S-iELISA.Hasilna, ku analisa nilai OD450nm tina 40 SADS-CoV séra négatip dikonfirmasi ku immunofluorescence assay (IFA) sareng Western blotting, nilai cut-off ditangtukeun janten 0.3711.Koéfisién variasi (CV) tina 6 séra positip SADS-CoV dina jero sareng antara ngajalankeun S-iELISA sadayana kirang ti 10%.Uji réaktivitas silang nunjukkeun yén S-iELISA henteu gaduh réaktivitas silang sareng séra virus babi sanés.Salaku tambahan, dumasar kana deteksi 111 conto sérum klinis, tingkat kabeneran sakabéh IFA sareng S-iELISA nyaéta 97,3%.Uji nétralisasi virus kalayan 7 nilai sérum OD450nm anu béda-béda nunjukkeun yén nilai OD450nm anu dideteksi ku S-iELISA sacara positif pakait sareng uji nétralisasi virus.Tungtungna, S-iELISA dipigawé dina 300 sampel sérum peternakan babi.Kit komérsial enterovirus porcine séjén nunjukkeun yén tingkat IgG positip SADS-CoV, TGEV, PDCoV sareng PEDV masing-masing 81,7%, 54%, sareng 65,3%., 6% masing-masing.Hasilna nunjukkeun yén S-iELISA spésifik, sénsitip, sareng tiasa diulang, sareng tiasa dianggo pikeun ngadeteksi inféksi SADS-CoV dina industri babi.Artikel ieu ditangtayungan ku hak cipta.sadaya hak disimpen.


waktos pos: Jun-22-2021